بررسي اجزاي موثر در كميت و كيفيت DNA ژنومي استخراج شده از گونه هاي سيكلامن موجود در ايران
پنج شنبه 6 مهر 1391 4:34 PM
| 2 : پژوهش و سازندگي زمستان 1385; 19(4 (پي آيند73) در زراعت و باغباني):11-16. |
| بررسي اجزاي موثر در كميت و كيفيت DNA ژنومي استخراج شده از گونه هاي سيكلامن موجود در ايران |
| اعلايي ميترا*,نادري روح انگيز,خليقي احمد,وزوايي علي,سلامي سيدعليرضا |
| * گروه باغباني، پرديس كشاورزي و منابع طبيعي كرج، دانشگاه تهران |
|
استخراج DNA ژنومي با كميت و كيفيت مطلوب از نيازهاي بنيادي زيست شناسي مولكولي است. استخراج DNA از بافت گياه به علت حضور كربوهيدرات ها، تانن ها، تركيبات پلي فنلي و پروتئين ها كه بر كيفيت DNA اثر منفي مي گذارد با مشكلاتي روبروست. لذا روش استخراجي كه بتواند اين مواد را به حداقل برساند بايد تشخيص و مورد استفاده قرار گيرند. در اين تحقيق چهار روش استخراج DNA شامل: 1- Murray و Thampson، 2- Doyle و Doyle، 3- Dellaporta و همكاران، 4- Lodi و همكاران به منظور انتخاب بهترين روش استخراج DNA از گياه زينتي سيكلامن مورد بررسي و ارزيابي قرار گرفتند. براي استخراج DNA، برگ هاي جوان و برگ هاي بالغ مورد استفاده گرفت. كميت و كيفيت DNA استخراج شده با هر چهار روش، با استفاده از روش هاي اسپكترو فتومتري، الكتروفوز بر روي ژل آگارز 1%، بررسي الگوي برش پذيري نمونه هاي DNA توسط اندونوكلئازهاي محدود كننده (EcoRI) و همچنين با انجام و اكنش زنجيرهاي پليمر از (PCR) مورد مقايسه قرار گرفتند. در نهايت با توجه به كميت و كيفيت DNA استخراج شده و نتايج حاصل از PCR، روش Murray، Thamposon به منظور استخراج DNA با خلوص بالا از برگ هاي جوان و بالغ اين گياه زينتي انتخاب شد. بيشترين مقدار DNA با كيفيت مطلوب از يك گرم بافت برگي جوان به مقدار (79mg/g) 395ng/ml با روش Murray Thompson بدست آمد. |
| كليد واژه: |
 |
|
نسخه قابل چاپ |
أَلْعِلْمُ ثَلاثَةٌ: أَلْفِقْهُ لِلاَْدْیانِ، وَ الطِّبُّ لِلاَْبْدانِ،وَ النَّحْوُ لِلِّسانِ. .
