پاسخ به:بانک مقالات زیست شناسی
2 : زيست شناسي ايران پاييز 1383; 17(3):227-246. |
|
مطالعه توليد آنزيم كيتيناز در قارچ تريكودرما |
|
سيداصلي نيسانا,حريقي محمدجواد,مطلبي مصطفي,زماني محمد |
|
|
در طول كشت گياهان زراعي كاهش محصول ناشي از حمله قارچهاي بيماريزا به گياهان همواره بعنوان مهمترين عامل زيانهاي اقتصادي محسوب ميشود. قارچ تريكودرما، بدليل ترشح بعضي از انواع آنزيمهاي كيتينازي، بعنوان عاملي قوي در كنترل بيولوژيك بيمارهاي قارچي مورد استفاده قرار مي گيرد.
در اين تحقيق، شرايط بهينه جهت توليد آنزيم كيتيناز در جدايه هاي مختلف قارچ تريكودرما مورد مطالعه قرار گرفت. شرايط بهينه بدست آمده عبارتند از، pH=5، 48 ساعت كشت در دماي 25 درجه سانتي گراد و هوادهي مناسب. پس از بهينه سازي شرايط توليد آنزيم كيتيناز در سه جدايه انتخابي قارچ تريكودرما، فعاليت آنزيم كيتينازي در 30 جدايه اين قارچ در شرايط بهينه بدست آمده بررسي و جدايه Trichoderma harzianum 8 با فعاليت 97U/ml و فعاليت ويژه 35U/mg بعنوان فعال ترين و جدايه Trichoderma sp.T.26 با فعاليت 44U/ml و فعاليت ويژه 5U/mg بعنوان ضعيف ترين جدايه انتخاب شدند. براي بررسي بيان ژنهاي اندوكيتيناز chit42, chit33, chit31 در جدايه Trichoderma harzianum8، كه فعال ترين جدايه از نظر توليد آنزيم كيتيناز ميباشد، الگوي SDS-PAGE در محيط هاي حاوي منابع كربني متفاوت مقايسه شد و محل تقريبي باندهاي سه اندوكيتيناز تعيين گرديد. ضمنا، سه جفت آغازگر اختصاصي بر اساس تواليهاي موجود از اين ژنها در NCBI طراحي شد و پس از انجام PCR اختصاصي، محصولات PCR توسط هضم با آنزيمهاي Restriction Endonuclease تاييد شد. بررسي نتايج بدست آمده از اين بخش، حضور هر سه ژن اندوكيتيناز را در اين جدايه قارچي تاييد مي كند. بدين ترتيب، با توجه به مطالعات انجام شده بر روي جدايه T. harzianum8، مي توان از اين جدايه در مطالعات مربوط به كنترل بيولوژيك بيماريهاي قارچي استفاده نمود.
|
|
كليد واژه: تريكودرما، آنزيم كيتيناز، شرايط بهينه توليد آنزيم، سنجش فعاليت آنزيم، تكثير ژن كيتيناز |
|
![](http://sid.ir/fa/image/PDF.gif) |
دوشنبه 1 خرداد 1391 8:25 AM
تشکرات از این پست