بانک مقالات زراعت و باغبانی

بتاگلوکوزيداز از آنزيم هاي سلولازي ميباشد که سلوبيوز و سلواليگوساکاريدهاي با زنجيره کوتاه را به گلوکز تجزيه مي نمايد. در اين تحقيق از 30 جدايه تريکودرما که اکثرا بومي ايران بودند جهت مطالعه ميزان توليد اين آنزيم استفاده گرديد. با توجه به نقش عوامل مختلفي نظير زمان کشت، دما، pH نوع منبع کربن و عوامل القا کننده بر ميزان توليد آنزيمهاي سلولازي توسط قارچها، شرايط بهينه توليد آنزيم بتاگلوکوزيداز، در جدايه Trichoderma reesei (PTCC) 5142 که در تحقيقات قبلي مشخص شده بود از فعال ترين جدايه هاي توليدکننده آنزيم هاي سلولازي مي باشد) مطالعه گرديد. بدين منظور از محيط کشت مندلز حاوي يکي از منابع کربني CMC, Avicel و يا کاغذ صافي، با pH هاي 4، 5، 6 و 7، لاکتوز و سلوبيوز به عنوان عوامل القا کننده در طول 14 روز کشت در دماهاي 25، 29 و 32 درجه سانتي گراد استفاده گرديد. نتايج بدست آمده نشان داد که شرايط بهينه براي توليد آنزيم بتاگلوکوزيداز در محيط کشت، دماي 28 درجه سانتي گراد، CMC=5، pH به عنوان منبع کربن، لاکتوز به عنوان القا کننده و روز هفتم کشت ميباشد. اين شرايط بهنيه جهت توليد آنزيم بتاگلوکوزيداز در 30 جدايه تريکودرما مورد استفاده قرار گرفت و مقايسه نتايج بدست آمده نشان داد که جدايه T.reesei (PTCC5142) داراي بيشترين فعاليت ويژه آنزيمي (0.45U/mg) مي باشد. همچنين جهت شناسايي ژن کد کننده آنزيم بتاگلوکزيداز استخراج DNA ژنومي به روش CTAB صورت گرفت. اين قطعه از ژن بتاگلوکوزيداز با استفاده از دو آغازگر اختصاصي (CP11, CP12) و با طول قطعه مورد انتظار (566 جفت باز) تکثير شد. الگوي هضم آنزيمي توسط آنزيم برشي PstI قطعه مذکور را تاييد نمود.

 نسخه قابل چاپ