پاسخ به:بانک مقالات بینایی
چهارشنبه 7 تیر 1391 6:56 PM
1 : بينا تابستان 1384; 10(4 (پي در پي 40)):419-429. |
كشت و تكثير ياخته هاي بنيادي ليمبوس انسان در محيط آزمايشگاه |
بهاروند حسين*,ابراهيمي مرضيه,جوادي محمدعلي,عين الهي بهرام,معصومي محمد |
* تهران، پژوهشكده رويان، گروه سلول هاي بنيادي |
هدف: ارزيابي کشت ياخته هاي بنيادي ليمبوس قرنيه انساني با حفظ خواص ذاتي و قدرت تکثيري آنها در آزمايشگاه به منظور پيوند در بيماران دچار نقص ياخته هاي بنيادي ناحيه ليمبوس. روش پژوهش: نمونه هاي ليمبوس حاوي ياخته هاي بنيادي، از بانک چشم جمهوري اسلامي ايران تهيه شد. کشت قطعات ليمبوس بر روي پرده آمنيوني بدون ياخته (برهنه) به مدت 21 روز صورت پذيرفت . موفولوژي ياخته ها پس از 13 و 21 روز کشت، توسط ايمونوسيتوشيمي، با استفاده از پادتن هاي کانکسين 43 کراتين – 3 و پان سيتو کراتين و بيان ژن هاي اختصاصي قرينه با روش RT-PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: پس از 2 تا 3 هفته ياخته هاي اپي تليوم ليمبوس ، صفحه اي در اندازه تقريبي 2×2 cm2 بر روي پرده آمنيوني برهنه تشکيل دادند. مطالعه هيستولوژي صفحه اپي تليومي تشکيل شده نشان داد که اين ياخته ها متشکل از 4-1 لايه ياخته اي بين محل قرارگيري قطعه بافتي و حاشيه کشت مي باشند. بررسي هاي ايمونوسيتوشيمي با استفاده از نمونه هاي ليمبوس و قرينه طبيعي و ليمبوس کشت شده، نمايانگر بيان کراتين -3 و کانکسين -43 در نمونه هاي قرنيه طبيعي بود ولي بيان ضعيفي از اين نشانگرها در ياخته هاي کشت شده ديده شد. هم چنين تحليل داده هاي RT- PCR نشان داد که ژن P63 وK12 هم در ياخته هاي ليمبوسي کشت شده و هم در نمونه هاي ليمبوس طبيعي بيان مي گردد؛ در حالي که در قرنيه ، تنها بيان ژن هاي K3و k12 ديده شده و بيان P63 مشاهده نشد. نتيجه گيري: مطالعه نشان داد که ياخته هاي ليمبوسي طي 21 روز کشت خواص بنيادي خود را از نظر موفولوژي و بيان ژن هاي خاص آن ناحيه حفظ نمودند و مي توان از آنها براي درمان بيماران دچار نقص ياخته هاي بنيادي ليمبوسي استفاده نمود. |
كليد واژه: |
![]() |
نسخه قابل چاپ |