پاسخ به:بانک مقالات بیماریهای گیاهی
دوشنبه 29 خرداد 1391 10:20 PM
10 : بيماريهاي گياهي 1384; 41(1):125-140. |
استفاده از روشهاي تشخيص سريع سرولوژيكي و مولكولي در تفكيك ويروسهاي عامل كوتولگي زرد جو |
راستگو مينا,خطابي بهنام,ايزدپناه كرامت اله* |
* بخش گياهپزشکي، دانشکده کشاورزي، دانشگاه شيراز |
تشخيص سريع و دقيق ويروسهاي کوتولگي زرد جو (BYDVs) و کوتولگي زرد غلات (CYDV) به منظور مديريت بيماري حائز اهميت مي باشد. در اين تحقيق روش هاي سرولوژيکي و مولکولي براي تشخيص سريع اين گروه از ويروسها مورد بررسي قرار گرفتند. در بين روشهاي سرولوژيکي Cocktail-ELISA, Indirect-ELISA, DAS-ELISA و TPIA که در اين تحقيق مورد استفاده قرار گرفتند، روش TPIA بدليل صرفه جويي در امکانات، قابليت استفاده در سطح مزرعه به طور وسيع و روش Cocktail-ELISA بدليل صرفه جويي در وقت کارائي بالايي داشتند و به خوبي قادر به تفکيک و تمايز سروتيپ ها بودند. در تشخيص مولکولي از آغازگرهاي عمومي تيره لوتئوويريده استفاده شد که با آموده خالص PAV و RPV به ترتيب قطعاتي به اندازه 1200 و 400 جفت باز تکثير کردند. بعلاوه سروتيپ هاي PAV و RPV به صورت کاملا اختصاصي با آغازگرهاي اختصاصي خود واکنش نشان دادند و به ترتيب قطعاتي به اندازه 700 و 800 جفت باز از آنها تکثير شد. تحت شرايط اين آزمايش ها، روش معمول RT-PCR براي تشخيص اين سروتيپ ها در عصاره خام گياه کارايي نداشت اما در صورت به دام اندازي اين ويروسها با پادتن اختصاصي (IC-RT-PCR) قطعه هاي مورد انتظار تکثير يافتند |
كليد واژه: BYDV-PAV، CYDV-RPV، روشهاي تشخيص سريع سرولوژيكي و مولكولي، RT-PCR، IC-RT-PCR، Cocktail-ELISA |
نسخه قابل چاپ |