پاسخ به:بانک مقالات بیماریهای گیاهی
دوشنبه 29 خرداد 1391 10:14 PM
| 5 : بيماريهاي گياهي 1384; 41(2):215-228. |
| تشخيص Ralstonia solanacearum در غده هاي بذري سيب زميني و خاک با استفاده از تکنيک PCR |
| مسلم خاني كبري,مظفري جواد*,علي زاده عزيزاله |
| * بخش تحقيقات ژنتيک، موسسه اصلاح و تهيه نهال و بذر کرج |
|
باکتري Ralstonia solanacearum عامل بيماري پژمردگي باکتريايي يکي از عوامل مهم در کاهش محصول سيب زميني در مناطق گرمسير و نيمه گرمسير مي باشد. آلودگي نهفته اين بيماري در غده هاي بذري ظاهرا سالم موجب گسترش سريع آن در خاکهاي غير آلوده مي گردد. به همين خاطر کنترل موثر آن نيازمند دستيابي به روشهاي دقيق و حساس تشخيص آلودگي در خاک و غده مي باشد. در اين تحقيق کارايي تکنيک PCR براي تشخيص مولکولي باکتري R. solanacearum مورد بررسي قرار گرفت. اين روش به تنهايي قادر به رديابي جمعيت هاي پايين باکتري در حد 104CFU/ml باکتري در عصاره گياه آلوده بود ولي پس از يک مرحله غني سازي به مدت 48 ساعت توانست تا 10CFU/ml باکتري در غده و خاک آلوده را نيز شناسايي نمايد. با استفاده از اين روش حضور و گسترش باکتري R. solanacearum در غده و ساقه گياهان آلوده در سه رقم هرتا، نيکولا و فيانا با استفاده از پرايمرهاي 759 و 760 نشان داده شد. پرايمرهاي مذکور بطور اختصاصي يک قطعه 281 جفت بازي از جدايه هاي R. solanacearum توليد نمودند. اين روش با موفقيت وجود باکتري R. solanacearum را در غلظتهاي 10 CFU/ml، 103، 105 و 107 در عصاره غني شده خاک آلوده رديابي نمود. عمل پيش غني سازي علاوه بر افزايش جمعيت پاتوژن باعث خنثي نمودن اثرات ممانعت کننده ها و در نهايت موجب افزايش دقت تشخيص در تکنيک PCR گرديد. |
| كليد واژه: سيب زميني، پژمردگي باکتريايي، Ralstonia solanacearum، PCR، غني سازي |
 |
|
نسخه قابل چاپ |
