بانک مقالات بیماریهای گیاهی

تاكنون چندين پوتي ويروس از گياهان تيره غلات در نقاط مختلف ايران گزارش شده اند. مطالعات مقدماتي نشان داده است كه اين جدايه ها با گروه بندي هايي كه در ساير نقاط دنيا براي پوتي ويروس هاي غلات ارايه شده است همخواني كامل ندارند. مطالعه حاضر به منظور تفكيك و گروه بندي پوتي ويروس هاي غلات در ايران با استفاده از آزمون هاي سرولوژيكي انجام شده است. در اين تحقيق جدايه هاي مولد موزاييك قياق در شيراز (JG-Shi)، كرج (JG-Krj)، اصفهان (JG-Sar)، آمل (JG-Aml)، رامسر (JG-Ram)، آستانه (JG-Ast)، صفادشت (JG-Saf) و ماهان (JG-Map) و نيشكر خوزستان (SC-Q86, SC-L66) و ساري (SC-Sar) مورد مطالعه قرار گرفتند. اين جدايه ها با استفاده از مايه زني مكانيكي به سورگوم منتقل و پس از خالص سازي بيولوژيك تكثير شدند. اين جدايه ها به روش “minipurrification” تغيير يافته و به ترتيب زير خالص سازي شدند. چهل گرم بافت آلوده با استفاده از 7.5 حجم بافرسيترات آمونيوم 0.1 مولار (pH=6.5) حاوي 2-ME %0.25, PVP%1 و NaDIECA %0.01 همگن سازي شد. افشره حاصله با افزودن 8% تريتون X-100 زلال سازي شد. پيكره هاي ويروسي با استفاده از سانتريفوژ كردن در سرعت بالا بر روي بالشكي از سوكروز 30% رسوب داده شدند. آموده هاي ويروسي با استفاده از ستون شيب چگالي سزيوم سولفات 10-50% خالص تر شدند. لايه ويروسي به دست آمده از ستون شيب چگالي جهت تهيه پادتن هاي چند همسانه اي به خرگوش تزريق شد. پادتن هاي بدست آمده در آزمون هاي نشت دو طرفه در آگار و ELISA به منظور تعيين ارتباط سرولوژيكي اين جدايه ها مورد استفاده قرار گرفتند.
پوتي ويروس هاي مولد موزاييك قياق در شيراز، كرج، اصفهان و ساري و نيز جدايه هاي نيشكر SC-Q86 و SC-L66 به طور موفقيت آميز با استفاده از روش “minipurrification” تغيير يافته خالص سازي شدند. عملكرد خالص سازي 50-10 ميلي گرم ويروس در هر 100 گرم بافت آلوده بود. SDS-PAGE در ژل آكريل آميد 12% نشان دهنده يك باند قوي در موفقيت 41-35 كيلو دالتون در جدايه هاي مختلف بود. وسترن بلات با استفاده از پادتن اختصاصي پروتئين پوششي نشان داد كه اين باند پروتئين پوششي ويروس مي باشد.
آزمون هاي سرولوژيكي نشان داد كه پوتي ويروس هاي مولد موزاييك غلات در ايران حداقل به سه گروه تقسيم مي شوند: (1) ويروس موزاييك ايراني قياق (IJMV)، شامل جدايه هاي JG-Ram, JG-Aml, JG-Sar, JG-Krj, JG-Shi و JG-Ast. اين گروه از نظر سرولوژيكي با MDMV, SrMV, SCMV و JGMV متفاوت است؛ (2) ويروس موزاييك نيشكر (SCMV) شامل جدايه SC-Q86؛ (3) ويروس موزاييك كوتولگي ذرت(MDMV)، شامل جدايه هاي SC-Sar, SC-L66 و SC-Isf. جدايه JG-Saf از نظر سرولوژيكي به IJMV و MDMV مرتبط بود در حالي كه جدايه SC-Sar با SCMV و MDMV ارتباط داشت. آزمون هاي سرولوژيكي نتوانستند مشخص كنند كه آيا اين جدايه ها ويروس هاي جديدي هستند و يا اينكه نوعي آلودگي مخلوط به دو ويروس مجزا در اين گياهان وجود داشته است.

 نسخه قابل چاپ