بانک مقالات زیست شناسی

هدف: هدف از اين مطالعه بررسي کارائي جذب DNA و انتقال ژن به سلول هاي کبدي جوجه نژاد لگهورن در دو سطح ترانسفکشن و ترانسدوکشن با لنتي ويروس هاي نوترکيب و شدت بيان ترانسژن مي باشد.
مواد و روش ها: براي ترانسفکشن يا ترانسدوکشن ويروسي، سلول ها در پليت هاي 96 خانه کشت داده شدند و در مراحل مختلف با ميکروسکوپ فلورسنس مشاهده گرديدند. تعداد سلول هاي GFP (Green Fluorescent Protein-positive) نرم افزار Grid Cell Counter و شدت بيان ترانسژن با نرم افزار ImageJ محاسبه و داده ها با نرم افزار SPSS آناليز شدند.
نتايج: بيان ژنGFP ، در سطح ترانسفکشن، در سلول هاي (Human Embryonic Kidney) HEK و (Chicken hepatoma cell line) LMH به ترتيب 6 ساعت و 9 ساعت بعد از انتقال ژن و در مرحله ترانسدوکشن به ترتيب 22 ساعت و 36 ساعت بعد مشاهده شدند. شمارش سلول هايGFP⁺، 48 ساعت پس از ترانسفکشن نشان داد که سلول هاي HEK و LMH به ترتيب 40 درصد و 35 درصد DNA را دريافت و بيان کرده اند. اين مقادير در 72 ساعت بترتيب به 95 درصد و 48 درصد رسيد. شمارش سلول هاي مثبت 72 و 96 ساعت پس از ترانسدوکشن ويروسي نيز الگوئي مشابه از نظر دريافت DNA توسط دو رده سلولي مزبور را به اثبات رسانيد. ليکن آناليز شدت بيان GFP نشان داد که رده HEK و LMH بترتيب 74 درصد و 89 درصد GFP را با اختلاف معني داري (P<0.01) بيان كردند.
نتيجه گيري: نتايج حاصله نشان داد که سلول هاي HEK از قدرت جذب بالاتري براي دريافت DNA برخوردار هستند با اين حال سلول هاي LMH قادرند ژن هاي خارجي را با شدت بيشتري بيان نمايند.

 نسخه قابل چاپ