پاسخ به:بانک مقالات زیست شناسی
یک شنبه 31 اردیبهشت 1391 2:31 PM
| 8 : زيست شناسي ايران زمستان 1385; 19(4):451-457. |
| بيان ژن، تخليص و بررسي کاهش لومينسانس لوسيفراز باکتريايي Xenorhabdus luminescence بر اثر جايگزيني گلوتامات 175 توسط گلايسين در زير واحد آلفا |
| رياحي مدوار علي,حسينخاني سامان*,خواجه خسرو,رنجبر بيژن |
| * تهران، دانشگاه تربيت مدرس، دانشکده علوم پايه، گروه بيوشيمي |
|
بهينه سازي بيان لوسيفراز جهش يافته و طبيعي، تخليص، و خاموش شدگي فلورسانس آنها در حضور غلظت هاي مختلف FMN مورد بررسي قرار گرفت. لوسيفراز باكتري ها داراي دو زيرواحد آلفا و بتا مي باشد. خصوصيات كاتاليتيكي آنزيم لوسيفراز باكتريايي بوسيله زيرواحد آلفا ديكته، و نشر نور در باکتري ها (با طول موج 490 nm) در حضور سوبستراهاي FMNH2، آلدئيد و اکسيژن مولکولي توسط آنزيم لوسيفراز کاتاليز مي شود. لوسيفراز باكتري ها را، بر پايه سرعت كاهش لومينسانس در يك بار سنجش با روش استاندارد، به دو گروه، لوسيفراز با سرعت كاهش كند و لوسيفراز با سرعت کاهش سريع طبقه بندي مي كنند. مطالعات انجام شده بروش جهش زايي اتفاقي بر روي زيرواحد آلفا در باکتري Xenorhabdus luminescence (با سرعت کاهش کند لومينسانس) نشان داد، كه اگر در جهش يافته گلوتامات 175 بوسيله گلايسين جايگزين شود، سرعت كاهش لومينسانس آن نسبت به لوسيفراز طبيعي سريعتر مي گردد. در اين مطالعه ضمن بهينه سازي بيان و تخليص آنزيم طبيعي و جهش يافته مشخص شد يکي از دلايل اصلي تفاوت كاهش لومينسانس بين لوسيفراز جهش يافته و لوسيفراز طبيعي، کاهش قدرت اتصال FMN به آنزيم، در لوسيفراز جهش يافته است. |
| كليد واژه: بيولومينسانس، لوسيفراز، FMN، خاموش شدگي |
 |
|
نسخه قابل چاپ |
