پاسخ به:بانک مقالات زیست شناسی
یک شنبه 31 اردیبهشت 1391 10:52 AM
14 : زيست شناسي ايران 1389; 23(1):132-140. |
بهينه سازي استخراج و تکثير DNA از بلوکهاي بافتي پارافيني با ارايه يك روش تركيبي |
لهراسبي نژاد آزاده,يعقوبي محمدمهدي*,ناظم حبيب اله |
* 2 کرمان، مرکز بين المللي علوم و تکنولوژي پيشرفته و علوم محيطي، پژوهشکده علوم محيطي، بخش بيوتكنولوژي |
بافتهاي پارافينه موجود در آرشيو بخشهاي آسيبشناسي منبع بسيار غني از نمونه هاي انساني براي مطالعات مولکولي به روشهايي مانند واكنش زنجيرهاي پليمراز (PCR) در بيماريهايي همچون سرطان ميباشند. اما مشکل موجود آن است که اسيدهاي نوکلئيک در اين بافتها در مسير تثبيت شدن و پارافينه نمودن، آسيب ديده و در بسياري از موارد کيفيت DNA استخراج شده براي PCR مناسب نميباشد. در اين تحقيق سعي شد با بررسي چند روش متداول استخراج و تکثير DNA از بافتهاي پارافينه، نقاط ضعف آنها برطرف شده و يک روش ترکيبي جديد معرفي شود. همچنين اثر آنزيمهاي مختلف Taq polymerase، pfu و pwo و مخلوط آنها در تکثير DNA بافت پارافينه مقايسه شد. نتايج نشان داد بازدهي استخراج روش تركيبي در مقايسه با روشهاي قبلي بيشتر بوده و DNA حاصل از آن قابليت تکثير بهتري در واکنش PCR دارد. |
كليد واژه: بلوک پارافينه، استخراج DNA، واکنش زنجيره اي پلي مراز، بافت سرطاني |
نسخه قابل چاپ |