پاسخ به:بانک مقالات زیست شناسی
یک شنبه 31 اردیبهشت 1391 10:24 AM
6 : زيست شناسي ايران 1389; 23(3):367-375. |
تخليص و بازيافت آلکالين پروتئاز مقاوم به حرارت در سامانه هاي دو فازي آبي |
مشايخي فريبا,اميدي نيا اسكندر*,شهبازي محمدي حميد,ابراهيمي راد مينا,حسينخاني سامان,گريگوريان آندره |
* تهران، انستيتو پاستور ايران، گروه بيوشيمي |
آلکالين پروتئازهاي مقاوم به حرارت گروهي از مهمترين آنزيمهاي صنعتي هستند که به علت حفظ عملکرد و پايداري در شرايط سخت نظير محدوده هاي pH قليايي، دماي بالا و حضور دناتوره کننده هاي شيميايي کاربردهاي فراواني دارند. در اين راستا، جداسازي و غربالگري آنزيمهاي جديد با خصوصيات موثر و نيز بهينه سازي روشهاي تخليص به عنوان اولين مرحله در مسير تحقيق و توسعه اين محصولات بيوکاتاليزوري محسوب مي شود. در اين تحقيق، تخليص و بازيافت آنزيم آلکالين پروتئاز مقاوم به حرارت از سويه Bacillus subtilis در سامانه دو فازي آبي تشكيل شده از پلي اتيلن گليکول و سيترات سديم مطالعه شد. بهترين شرايط تخليص آنزيم در سامانه متشكل از 22 درصد پلي اتيلن گليکول 10000 دالتون، 18 درصد سيترات سديم و 12 درصد كلريد سديم با pH=8به دست آمد. پارامترهاي تخليص شامل ضريب تفکيک آنزيم، بازده، بازيافت، فاکتور تخليص و فعاليت ويژه به ترتيب 37.83، 97.7797 درصد، 177.5 درصد، 27 و 3325.79 U / mg protein محاسبه گرديد. وزن مولکولي آنزيم با استفاده از SDS - PAGE در حدود 41 kDa تخمين زده شد و خصوصيات کينتيکي Km و Vmax به ترتيب، 2.21 ميلي مولار و 0.26 U /ml محاسبه شد. |
كليد واژه: سامانه هاي دو فازي آبي، تخليص، آلکالين پروتئاز مقاوم به حرارت، پلي اتيلن گليكول، سيترات سديم |
نسخه قابل چاپ |